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貨源介紹

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　　中文名稱：大腸埃希氏菌C3000

　　拉丁名稱：Escherichia coli

　　模式菌株：否

　　其它保藏中心編號(hào)：=ATCC 15597

　　來源歷史：←中國食品藥品檢定研究院

　　收藏時(shí)間：2021/8/13

　　原始編號(hào)：C-3000

　　特征特性：菌體短桿狀，單個(gè)或成對(duì)排列，革蘭氏陰性，無芽胞。

　　參考用途：噬菌體宿主

　　生物危害程度：四類

　　致病對(duì)象：無

　　分離基物：來源于大腸埃希氏菌K12

　　培養(yǎng)基編號(hào)：

　　培養(yǎng)基名稱：營養(yǎng)肉汁瓊脂

　　培養(yǎng)基成分：蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1.0L，pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4?H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。推薦使用商品化成品培養(yǎng)基。

　　培養(yǎng)溫度：36℃

　　需氧類型：好氧

　　注意事項(xiàng)

　　1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，準(zhǔn)備1支含有5-10ml液體培養(yǎng)基的試管和2個(gè)平板；用酒精燈灼燒頂部后迅速滴上無菌水使之破裂，隨后用鑷子敲碎；吸取0.5ml液體培養(yǎng)基打入凍干管充分溶解后重新打回液體試管中混勻；吸取0.2ml菌懸液打入平板涂布混勻，重復(fù)2次獲得2個(gè)平板；將液體試管和平板全部置于培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，經(jīng)過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長，這時(shí)需較長的培養(yǎng)時(shí)間；若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)；如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；2）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；3）菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；4）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為2-25年；

　　5）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降或者不活等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏胶?個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；

　　6）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。

　　7）西林瓶開封：用75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜內(nèi)使用尖嘴鉗去除塑料蓋及鋁蓋，注意不要同時(shí)打開膠塞。緩慢開啟膠塞，用75%酒精棉消毒瓶口部分，使用無菌吸管注入0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基復(fù)溶凍干粉末。

　　8）安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。

　　9）甘油管使用：使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。