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HS 683 人腦膠質瘤細胞 培養傳代信息介紹

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所在地區:湖北 時間:2024-03-26【加入收藏夾】【關閉

貨源介紹

細胞介紹

HS 683細胞源自76歲白人男性的左顳葉側膠質瘤組織。HS 683細胞有微絨毛,無橋粒。HS 683細胞可以用于3D細胞培養、癌癥研究、神經科學研究。

基本信息

細胞別稱:Hs 683;HS-683;Hs-683;Hs683;

HS683;Hs 683.T;HS 683T;Hs683T

細胞來源:腦;左顳葉

細胞形態:成纖維細胞樣

生長特性:貼壁生長

安全等級:BSL1

包裝規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

推薦換液:2~3次/周

傳代比例:1:2-1:4

倍增時間:~49-96 hours

保藏機構:ATCC;HTB-138

培養保存

培養體系:DMEM(TM055)+10%FBS(TS500)

培養條件:氣相:空氣,95%;CO2.5%;溫度:37℃

凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+40%FBS(TS500),液氮保存

傳代步驟

如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次;

加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化;

按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻;

收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續傳代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。

凍存步驟

細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數;

4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為5%,細胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識;

將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞用途

僅供科研使用。

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